Vad är antikroppar i blodet - sorter och indikationer för analys, normen och orsakerna till avvikelser

Laboratorietester är nödvändiga för att ställa rätt diagnos, hjälpa läkare att fastställa sjukdomens svårighetsgrad, graden av skada på inre organ och välja den bästa behandlingsregimen. Ett blodprov för antikroppar är obligatoriskt för gravida kvinnor och de patienter som har nedsatt immun-, reproduktions- eller könssystem, sköldkörteln.

Variationer av antikroppar

Under olika livstider "bekanta" människokroppen med olika patogener, kemikalier (hushållskemikalier, läkemedel), nedbrytningsprodukterna av sina egna celler (till exempel med sår, inflammation, purulenta hudskador). Som svar på detta börjar han producera sina egna immunoglobuliner eller antikroppar i blodet - det är speciella proteinföreningar som bildas av lymfocyter och fungerar som immunstimulant.

I immunologiska laboratorier isoleras fem typer av antikroppar, som var och en verkar strikt mot vissa antigener:

  • IgM är det första immunglobulinet som börjar produceras när en infektion kommer in i kroppen. Dess roll är att stimulera immunitet mot den primära kampen mot sjukdomen.
  • IgG - visas 3-5 dagar efter sjukdomens början. Det bildar en stabil immunitet mot infektioner, ansvarar för effektiviteten av vaccination. Denna klass av proteinföreningar är så små i storlek att den kan tränga igenom placentabarriären och bilda fostrets primära immunitet..
  • IgA - skydda mag-tarmkanalen, urinvägarna och luftvägarna mot virus, bakterier, bakterier. De binder främmande föremål och låter dem inte få fotfäste på slemhinnans väggar.
  • IgE - aktiveras för att skydda kroppen från parasiter, svampar och allergener. De är lokaliserade främst i bronkier, submukös hud, tarmar och mage. Delta i bildandet av sekundär immunitet. I fri form i blodet är praktiskt taget frånvarande.
  • IgD är en ofullständigt studerad fraktion. Det antas att dessa medel är ansvariga för bildandet av lokal immunitet, de börjar produceras under förvärring av kroniska infektioner eller myelom. Mindre än 1% av fraktionen av alla immunoglobuliner i serum.

Alla kan båda vara fritt belägna i blodplasma och fästa vid ytan på infekterade celler. Genom att känna igen antigenet binder specifika proteiner till det med svansen. Det fungerar som en typ av signal för specialiserade immunceller som ansvarar för att neutralisera främmande föremål. Beroende på hur proteiner interagerar med antigen, delas de upp i flera typer:

  • Anti-smittsam eller parasiterande - binder till kroppen av patogena mikroorganismer, vilket leder till deras död.
  • Antitoxic - påverkar inte främmande kroppers vitala aktivitet, utan neutraliserar gifterna de producerar.
  • Autoantikroppar - utlöser utvecklingen av autoimmuna störningar genom att attackera friska celler i värdkroppen.
  • Alloreaktivt - immunoglobuliner som motsätter sig antigenen i vävnader och celler från andra organismer av samma biologiska art. Analys för bestämning av antikroppar från denna fraktion utförs under transplantation (transplantation) av njurar, lever, benmärg.
  • Isoantikroppar - specifika proteinföreningar produceras mot cellmedel från andra biologiska arter. Närvaron av antikroppar i blodet gör det omöjligt att transplantera organ mellan evolutionärt och immunologiskt liknande arter (till exempel en hjärttransplantation från schimpanser till människor).
  • Antiidiotypiska - proteinföreningar utformade för att neutralisera överskottet av sina egna antikroppar. Dessutom minns denna immunoglobulinfraktion strukturstrukturen hos de patogena cellerna mot vilken den ursprungliga antikroppen utvecklades och reproducerar den när det främmande medlet återigen kommer in i blodet.

Blodtest för antikroppar

En modern metod för laboratoriediagnos av olika sjukdomar är studien av ELISA i blod (immunofluorescensanalys). Detta antikroppstest hjälper till att bestämma titer (aktivitet) för immunoglobuliner, deras klass och att fastställa i vilket utvecklingsstadium den patologiska processen är. Forskningsmetoden består av flera steg:

  1. Till att börja med får laboratorieassistenten ett prov av biologisk vätska från patienten - blodserum.
  2. Det resulterande provet placeras på en speciell plastplatta med brunnar som redan innehåller renade antigener av den önskade patogenen eller proteinet (i fall antigenet måste bestämmas).
  3. Ett speciellt färgämne tillsätts till brunnarna, som vid en positiv enzymreaktion färgar immunkomplexen.
  4. Beroende på färgningstätheten gör laboratorieassistenten en slutsats om resultaten av analysen.

Forskare kommer att behöva en till tre dagar för att genomföra testet. Studien i sig är av två typer: kvalitativ och kvantitativ. I det första fallet förstås att det önskade antigenet kommer att hittas eller tvärtom i blodprovet. Ett kvantitativt test har en mer komplex kedjereaktion och hjälper till att dra slutsatser om koncentrationen av antikroppar i patientens blod, fastställa deras klass, utvärdera hur snabbt infektionsprocessen utvecklas.

Varför ta ett antikroppstest

ELISA-test utförs i olika situationer. Under senare år har denna teknik till exempel använts aktivt i experimentell medicin för att utveckla nya läkemedel och i kliniska prövningar. En analys av närvaron av antikroppar i blodet måste förskrivas före eller under graviditeten för att identifiera proteinföreningar som är aktiva mot TORCH-infektioner (sjukdomar som överförs i livmodern från mor till barn):

  • toxoplasmos;
  • rubella;
  • cytomegalovirusinfektion;
  • herpesvirus.

Testresultaten hjälper till att bestämma effektiviteten hos den valda behandlingsmetoden, fastställa typen av virus, dess aktivitet. I klinisk praxis föreskrivs ett ELISA-test för följande indikationer:

  • Diagnos av sexuellt överförda sjukdomar (STD). Dessa inkluderar: klamydia, ureaplasmosis, mycoplasmosis, trichomoniasis, syfilis.
  • Bestämning av patologier i sköldkörteln eller andra endokrina körtlar.
  • Diagnos av viral hepatit C, B, D, A, E, AIDS eller HIV-infektion.
  • Bestämning av allergen eller föreningar som orsakar förgiftning vid förgiftning, orm eller insektsbett.
  • Bestämning av typen av diabetes mellitus, vävnadsresistens mot insulin.
  • Infertilitetsbehandling. Närvaron av antispermier eller anti-ovarieantikroppar i blodet orsakar omöjligheten av en produktiv befruktning.
  • Diagnos av infektionssjukdomar överförda via kontakt, luftburna eller fekal-orala vägar - helminthiska invasioner, difteri, stivkrampa, leptospiros (en sjukdom som kännetecknas av skador på kapillärerna i njurarna och levern), mässling, vattkoppor.
  • Diagnos eller behandling av cancer, benmärgssjukdom.

Hur man passerar

Beroende på livsstil, näringstyp, psyko-emotionellt tillstånd, förändras sammansättningen av blodet hos någon person ständigt, därför, innan studiens början, måste en viss regim följas. Förberedelserna tar 2-3 dagar och kräver följande regler:

  • Det är nödvändigt att donera blod för antikroppar från en blodåra på morgonen och alltid på tom mage. Staketet utförs av en specialist med sterila instrument på ett sjukhus.
  • För att få de mest exakta resultaten är det nödvändigt att utesluta rökt, kryddig, salt och stekt mat från den dagliga kosten 2 dagar före leverans av biologiskt material. Under samma period är det tillrådligt att helt sluta röka, dricka alkoholhaltiga drycker eller alkoholinnehållande droger, fruktjuicer.
  • Om analysen föreskrivs av en läkare för att bestämma typen av sexuellt överförd sjukdom, diagnostisera helminthisk invasion, hepatit eller röda hund, bör några dagar bytas till en mjölkdiet.
  • Du kan inte skicka in materialet för forskning efter en ny känslomässig chock, genomgått fluorografi, ultraljud, dator eller magnetisk resonansavbildning, fysioterapi.

Avkodning av ett blodprov för antikroppar

I den diagnostiska planen är endast tre typer av immunglobuliner betydande: IgM, IgG, IgA. Genom deras avvikelse från normen kan man bedöma närvaro eller frånvaro av infektion. Ett negativt resultat av analysen är inte en absolut indikator på att den smittsamma processen är frånvarande. Detta beror på det faktum att efter infektion tar bildandet av en kedjereaktion av immunitet lite tid - från 2-3 dagar till 2-3 veckor. För att bekräfta ett negativt resultat måste ELISA-testet upprepas efter en tid..

Förekomsten av antikroppar indikerar ofta att allergener, virus, bakterier eller andra mikroorganismer finns i blodet. Även ett positivt resultat betraktas inte alltid som en patologi. Exempelvis genom att producera ytterligare immunglobuliner kan kroppen svara på felaktigt utvald behandling, befruktning och organtransplantation. I allmänhet hjälper studiens resultat att svara på följande frågor:

  • hur fullt reagerar immunsystemet på infektion är det nödvändigt att vidta ytterligare behandlingsåtgärder;
  • i vilket utvecklingsstadium är sjukdomen;
  • Har personen onkologiska sjukdomar;
  • hur sker processen för implantatöverlevnad;
  • vilken substans som orsakade utvecklingen av allergier;
  • huruvida infektion med virus, parasiter, bakterier har inträffat och hur länge;
  • om kronisk sjukdom försämrades.

Immunoglobulin av klass A är en av de viktigaste för differentiell diagnos. Den finns ständigt i kroppen och står för cirka 10-25% av alla immunoglobulinfraktioner. IgA-referensvärden kan variera beroende på ålder och kön:

Blodtest för antikroppar

Antikroppstest

Människokroppen är ett av de mest komplexa systemen, där allt är sammankopplat och komplementärt. Det mest fantastiska i människokroppen är att han själv kan hantera ett antal sjukdomar.

Cirkulationssystemet kan berätta om alla processer som sker i kroppen. Antikroppar i blodet produceras när främmande ämnen som virus, bakterier eller allergener förekommer..

I mänskligt blod finns det mer än en miljon olika antikroppar, de verkar mycket tidigare än patogener. Antikroppar bildas genom att kombinera en mängd olika blodkroppar och lymfocyter..

De skyddar kroppen. Om patogener upptäcks börjar en viss typ av antikropp produceras omedelbart, vilket direkt kommer att bekämpa denna typ av infektion..

Antikroppsklassificering

Forskare har upptäckt och studerat vissa antikroppar, för enkelhets skull utses de av vissa markeringar. Varje grupp är relaterad till vissa antigener:

  1. IgM-gruppen - antikroppar som snabbt svarar på infektioner i kroppen, de är de första som bygger en skyddsbarriär. Ett stort antal antikroppar från denna grupp i blodet indikerar sjukdomens början.
  2. IgA-grupp - antikroppar som också reagerar snabbt på sjukdomar, men främst på kroppens slemhinnor. En hög mängd av sådana antikroppar i blodet kan indikera närvaron av akuta luftvägssjukdomar, hud- och leversjukdomar.
  3. IgE-grupp - dessa molekyler är känsliga för närvaron av bakterier och svampar. Den viktigaste gruppen av antikroppar för gravida kvinnor, de är ansvariga för utvecklingen av stark immunitet i det framtida barnet.
  4. IgG-gruppen ansvarar för utvecklingen av ihållande immunitet och skydd mot toxiska effekter..
  5. IgD-grupp - närvarande i blodet i en liten mängd, ännu inte helt förstått.

Analysen hjälper till att bestämma spridningen av sjukdomen - en svamp-, virus- eller bakterieinfektion. Med antalet antikroppar av ett eller annat slag kan du bestämma sjukdomsförloppet, i vilket skede den är och hur kroppen kämpar mot den.

Indikationer för att donera blod för antikroppar

En liknande typ av analys föreskrivs för att bestämma immunitetstillståndet, med systematiska sjukdomar och även under ett antal förhållanden.

Vem tilldelas en liknande analys:

  • Patienten diagnostiseras systematiskt med infektioner;
  • Patienter med onkologi, allergier och med autoimmun sjukdom;
  • Som förberedelse för operation;
  • Innan en organtransplantationsoperation;
  • Under rehabiliteringstiden för kroppen efter allvarlig sjukdom;
  • Under graviditet;
  • För att bestämma den exakta doseringen av immunglobulin.

Denna typ av studie föreskrivs också om det finns misstankar om en sjukdom med mässling, röda hundar, hepatit. Analysen används för de första symptomen på infektion med vattkoppor, helminths, giardia, poliomyelit, herpes, cirrhosis, onkologi, HIV-infektion.

Vid kronisk infertilitet föreskrivs test för detektion av antikroppar mot spermier och hCG.

Behovet av denna undersökning är förståeligt, efter att ha fått resultaten kan läkaren ställa en diagnos, förskriva behandling och justera dosen av det ordinerade läkemedlet. Analysdata kommer också att hjälpa till att spåra utvecklingen av sjukdomen eller stoppa den i början.

Antikroppsberedning

Om läkaren insisterar på att donera blod för antikroppar, är detta viktigt, och denna undersökning kan inte ignoreras. För att få ett tillförlitligt resultat måste du följa ett antal regler:

  • Blod tas på morgonen på tom mage (all konsumtion av mat, vatten och tobak är utesluten);
  • Några dagar innan detta måste du hålla fast vid en viss diet. Allt skarpt, fett och salt bör uteslutas från kosten. Minimerad alkohol- och kaffekonsumtion.
  • Undvik fysisk aktivitet och fysioterapikurser per dag.
  • Donera inte blod för antikroppar om patienten tar medicin eller just har avslutat en läkemedelsbehandling.

Graviditet och antikroppar

Under graviditet är blodprover för antikroppar av stor betydelse, särskilt om rhesusfaktorn hos föräldrar är annorlunda. Det är särskilt viktigt att spåra antikroppar om en gravid kvinna har ett Rhesus-negativt blodantal och en positiv far till en framtida baby.

I sådana situationer får barnet ofta farens Rh-faktor, och kvinnans kropp reagerar på detta med snabb bildning av antikroppar, vilket kan leda till fosteravstötning.

Det finns en Rhesus-konflikt, eftersom moderns kropp tar bildandet och utvecklingen av fostret som en främmande organism och börjar slåss mot det.

Upprepad graviditet är den farligaste, eftersom kvinnans kropp under den första graviditeten har utvecklat ett stort antal antikroppar och de börjar slåss i full kraft..

Analysen för antikroppar visar deras storlek, och läkaren bestämmer hur mycket immunglobulin som ska förskrivas för att förstöra dem..

Röda hund

Rubella är en mycket farlig sjukdom för ett gravid och ofött barn. Detta är en infektionssjukdom som provocerar utvecklingen av fosterbildningar, felaktig bildning av dess organ. Förutom rubella i de tidiga stadierna av graviditeten doneras nödvändigtvis blod för facklainfektioner.

Om resultatet är positivt övervägs tester som kan visa att en kvinna har haft denna sjukdom och att hon har utvecklat tillräckligt med antikroppar för att bekämpa återfallet av sjukdomen..

Resultaten kan visa att en kvinna har varit sjuk under en tid, med ett sådant resultat får hon en abort, annars är risken för medfödda avvikelser hos fostret mycket hög.

Herpes

En viktig studie under graviditeten är ett antikroppstest för herpes. Herpes själv kan leva i en vuxen kropp utan att orsaka några problem.

Under graviditeten kan detta virus ha en irreparabel effekt på det ofödda barns hälsa. Det orsakar missbildningar av fosterorganen och leder till och med till missfall.

Giardia

Upptäckten av giardia genom ett blodprov ger inte en korrekt bild, eftersom resultatet kommer att förbli positivt under lång tid efter behandlingen. Huvudtypen av analysen är fortfarande leverans av avföring för giardiasis.

inälvsmaskar

Helminthägg är svåra att upptäcka med den traditionella metoden - avföring av avföring. Anthelmintiska antikroppar ger det mest exakta testresultatet, det är bäst att göra en analys flera gånger. Om resultatet var negativt vid första leveransen, upprepa proceduren efter två veckor.

Hepatit C

Ett positivt resultat av de upptäckta IgG-antikropparna antyder att patienten har hepatit, har förvärvat en kronisk form eller varit i kontakt med en infekterad person.

Ett positivt resultat av IgM-antikroppar indikerar att sjukdomen är i ett aktivt stadium. Med snabb upptäckt av patogener kan du noggrant diagnostisera och förskriva en effektiv behandling som förhindrar utvecklingen av sjukdomen.

Syfilis

Tidig diagnos av syfilis i kroppen låter dig förskriva en effektiv behandling. För att upptäcka syfilis används metoden för att detektera flera antikroppar, denna metod är alltid korrekt.

IgG- och IgM-antikroppar detekteras, närvaron av den första indikerar en kronisk form av sjukdomen, närvaron av den andra indikerar en akut form.

Tuberkulos

Det första tuberkulostestet är en röntgenstråle. Tyvärr upptäcker det inte alltid sjukdomen. Det finns också typer av tuberkulos som utvecklas utanför lungorna..

Sådana former hjälper till att detektera IgM- och IgG-antikroppar. Den välkända Mantoux-reaktionen innehåller en uppsättning av dessa antikroppar och hjälper till att identifiera sjukdomen effektivt och på kort tid..

Slutsats

En analys av antikroppar i blodet hjälper till att identifiera ett stort antal sjukdomar, både i det inledande skedet och i en kronisk form. Denna metod låter dig klargöra diagnosen som läkaren ställer när du bestämmer typen av infektion eller för en helhetsbild av immunsystemets tillstånd och föreskriver lämplig behandling.

En sådan studie är särskilt viktig för gravida kvinnor, eftersom en snabb upptäckt av sjukdomar kommer att hjälpa till att förhindra missbildningar av foster och upprätthålla graviditet.

Det är bäst om blodantikroppstest utförs under graviditetsplanering, då kommer det att vara möjligt att genomföra en fullständig behandling och risken för komplikationer under denna period minskar avsevärt.

Ett blodprov för antikroppar finns i många laboratorier, när du väljer en plats bör du vara uppmärksam på listan över möjliga studier. Ju större den är, desto fler möjligheter har laboratoriet och desto mer exakta blir resultaten.

Priset på analyser i olika laboratorier kommer att skilja sig något, eftersom förbrukningsvarorna för studierna är desamma.

Avkodningen av undersökningsresultaten tillhandahålls bäst till läkaren, eftersom olika faktorer beaktas - ålder, kön, patientens tillstånd.

Antikroppar mot coronavirus: hopp och verklighet

Testet för antikroppar mot coronavirus idag håller på att bli en besatthet och den ultimata drömmen för många människor som stannar hemma. Men det fanns, det fanns en misstänkt hosta på vintern, och SARS fortsatte exakt som en mild form av COVID-19, och stann sedan hemma, bär en mask, var rädd för att besöka din mormor och lida av fysisk inaktivitet! Men en stark organisme, det var säkert "det." Nu, om det fanns ett sådant magiskt test som skulle visa att du redan har varit sjuk och nu är du inte bara skyddad från infektion, utan också säker för andra. Detta är vad som låter dig göra ett antikroppstest. Det är sant med ett gäng nyanser och reservationer. Hur denna metod fungerar och varför så många hopp och så många tvivel är förknippade med den, förstår Med AboutMe.

Vad är antikroppar?

För att känna igen och förstöra cellerna i patogena mikroorganismer producerar vårt immunsystem antikroppar. Dessa är ganska stora plasmaproteiner som har en Y-form. De skiljer sig från varandra i områden som de binder till proteiner på ytan av virus, bakterier, svampar och parasiter. Efter att antikropparna binder till exempel till en viral partikel förstör de antingen själva eller lockar andra specialiserade celler i immunsystemet för att hjälpa till. Antikroppar kallas också immunoglobuliner, för kort - Ig.

De allra flesta immunglobuliner inkluderar två tunga proteinkedjor och två lätta. Vissa antikroppar finns i blodplasma i form av monomerer - enskilda Y-formade proteiner, och vissa föredrar att existera i form av dimerer (ett komplex av två molekyler) eller till och med pentamerer (av fem) eller hexamerer (av sex proteinmolekyler).

Antikroppar produceras av B-lymfocyter. En enda B-lymfocyt kan producera endast en typ av antikropp. Så i människokroppen kan det finnas minst en miljon B-lymfocyter som producerar olika antikroppar.

B-lymfocyter bildar specifika B-receptorer, genom vilka immunceller bestämmer vilka B-lymfocyter som måste aktiveras för att producera antikroppar.

Typer av mänskliga antikroppar

Hos däggdjur, det vill säga även hos människor, finns det 5 klasser av antikroppar, som fick sitt namn av typen av tunga kedjor:

  • IgA - antikroppar i denna klass finns huvudsakligen i vår kropps hemligheter. De finns i saliv, slem som produceras i näsan, i bröstmjölk och i matsmältningssaft. I plasma finns det relativt få av dem - bara 10-15% av den totala volymen av allt Ig. Detta är vår första försvarslinje för slemhinnorna. IgA i sig har inte bakteriedödande egenskaper, det vill säga det förstör inte bakterier, men de neutraliserar gifterna som dessa bakterier producerar. De aktiverar också kroppens defensiva immunsvar mot virusinvasion. Det är IgA som ger den specifika immuniteten hos nyfödda som de får med modersmjölken.
  • IgE - alla allergikere känner till dessa antikroppar. Det är dessa IGS som spelar en ledande roll i utvecklingen av en allergisk reaktion, vilket är ett manifestation av immunsystemets överkänslighet. Hos allergikare kan IgE vara 10 gånger högre än hos en vanlig person. Och IgE ansvarar för immunsvaret mot maskar. IgE-koncentrationen ökar också med vissa autoimmuna sjukdomar, såsom psoriasis eller reumatoid artrit.
  • IgM - detta är en mycket intressant klass antikroppar, relevanta för närvarande. När en patogen kommer in i kroppen är det dessa immunglobuliner som bildas först. Det här är den tyngsta Ig av alla. De bildar pentamerer av fem Y-formade proteinmolekyler. Deras variabla regioner på den gaffelade svansen hos Y-proteiner som sticker ut jämförs med en uppsättning delar från designern, från vilken valfri konfiguration kan byggas. Det är denna unika konfiguration som bildas vid kontakt av IgM med ytproteiner av ett virus eller en bakterie. Om det finns mycket IgM i blodet hos en person, till exempel till coronavirus, betyder det att infektionen är i ett tidigt skede - personen är sjuk.
  • IgD - immunoglobuliner av denna typ i blodplasma är få, cirka 0,25% av den totala Ig-volymen. Forskare tror att IgD arbetar tillsammans med IgM och kompletterar dem funktionellt.
  • IgG är våra viktigaste antikroppar i ljuset av koronaviruspandemin. Antikroppar av denna klass i blodet mest av allt - 75%, och detta är den viktigaste typen av immunglobulin. De binder till patogener som kommer in i kroppen och leder därmed till deras immobilisering och agglutination. När IgG sitter på ytan av viruset, bakterier, svamp, kommer dessa aggressorer in i synfältet för cellerna i immunsystemet i fagocyter, som känner igen skadedjuret och förstör det. IgG definierar inte bara fiender, de utlöser också ett komplementsystem, vilket leder till bildning av proteiner som är nödvändiga för att förstöra patogena mikroorganismer. IgG neutraliserar också toxiner. De finns också i bröstmjölk och kan även korsa morkakan, vilket ger barnet skydd både före födseln och under de första månaderna av livet efter dem. Närvaron av IgG för en specifik infektion i blodplasma indikerar att kroppen inte bara har träffats med ett smittämne utan också har lärt sig hur man hanterar det.

Således analyserar enzymimmunoanalysen (ELISA) närvaron av antikroppar IgM och IgG. Om det endast finns IgM-antikroppar i blodplasma, betyder det att personen har blivit sjuk nyligen och är sjuk för tillfället. Om det finns både IgM och IgG, betyder det att kampen mot infektion är i full gång och immunsystemet producerar redan de antikroppar som är nödvändiga för att förstöra viruset eller bakterierna. Om bara IgG upptäcks i blodplasma, betyder det att infektionen var, men kroppen lyckades besegra den, botades, men kommer fortfarande ihåg hur hantera den.

För de som undrar hur många variationer av antikroppar som kan existera och om dessa varianter slutar under en persons liv, låt oss ange att DNA som kodar för de variabla regionerna av antikroppar innehåller 400 variabla gener, 12 mångfaldsgener och 4 kopplande gener. I olika kombinationer tillåter de dig att koda mer än 200 tusen sorter av variabla regioner. Och detta är bortsett från förändringar i själva genens nukleotider. Enligt forskare kan människokroppen producera 100 miljoner olika antikroppar som kan känna igen nästan alla befintliga ämnen som är främmande för oss. Detta räcker för alla, även en person som är mycket aktivt i kontakt med infektioner.

Coronavirus-tester

När pandemin just började var huvudidén att identifiera personer smittade med coronavirus. Därför var det viktigaste skapandet av ett test som låter dig bestämma virusets RNA i mänskliga utsöndringar. Koncentrationen av coronavirus i saliv och i slem från nasopharynx är mycket högre än i blod, så det är en utstryk från näshålan som tas för forskning och inte blod från fingret.

Det är nu känt att oftare SARS-CoV-2-infektion är asymptomatisk. Det finns dock kvar kategorier av befolkningen för vilken coronavirusinfektion kan bli dödlig. Därför är det så viktigt att förstå vem som idag för det första inte kommer att bli sjuk själv, och för det andra inte kommer att bli en dold smittkälla för människor i riskzonen. Och nu kommer tester för antikroppar mot coronavirus upp.

Som nämnts ovan är huvudintresse IgG-antikroppar. Det är obekvämt att diagnostisera sjukdomen av ELISA. IgM-antikroppar visas inte direkt utan under de första dagarna av sjukdomen. Men om en person inte har några symtom, men har IgM-antikroppar, indikerar detta en asymptomatisk sjukdomsförlopp.

Även med IgG-antikroppar är det inte lätt. De förekommer, enligt CDC, 1-3 veckor efter infektion. Så detta test är relevant för de som har haft coronavirus (eller något som liknar det) åtminstone för några veckor sedan.

Du läser mycket, och vi uppskattar det!

Lämna din e-post för att alltid få viktig information och tjänster för att upprätthålla din hälsa

Vetenskapen! Hur smittar viruset och hur reagerar immunsystemet

Virus är mycket intressanta varelser. De har inte celler, ur vetenskapens synvinkel anses de inte vara levande... och vetenskapen kan fortfarande inte exakt säga vad det är.
Allt om virus är mycket svårt! Därför bevittnar vi en sådan uppståndelse!
För att förstå detta till ett minimum måste du åtminstone känna till följande villkor:
1) Deoxiribonukleinsyra;
2) Ribonukleinsyra;
3) kapsid;
4) receptorer och coreceptorer;
5) membran;
6) en nyckellåsanslutning;
7) integras;
8) proteas;
9) omvänt transkriptas;
10) domän;
11) transkription;
12) budbärare;
13) cytoplasma;
14) replikering;

Virus multiplicerar i cellen. Men varje virus är specialiserat på vissa celler!
Så HIV infekterar T-lymfocyter, influensa infekterar epitel i struphuvud och lungor, coronavirus infekterar epitel i övre luftvägar, lungor och mag-tarmkanalen, Herpes påverkar nerverna och orsakar neuroinfektioner, hepatit infekterar levercellerna, etc..
Hur ett virus kommer in i en cell:


De där. När ett virus kommer in i kroppens cell förvandlas det till en fabrik för produktion av nya virus.

Hur reagerar immunsystemet? Vanligtvis, om det finns få virus, lyckas de infekterade cellerna förstöra lymfocyter och naturliga mördare..
Men om virusdosen är hög eller immuniteten försvagas av spänningen i avloppsröret under krisen på marknaderna, startar denna viralfabrik framgångsrikt!

Men det är inte så illa! Kroppen har ett larm! Om viruset kommer in i cellen, börjar cellen att inducera och kasta speciella interferonproteiner runt sig själv. Dessa proteiner ger en signal till de angränsande cellerna och cellerna blockerar deras membran, vilket förhindrar virusen från att komma in i sig själva. En signal ges också till immuncellerna att något är fel och att du måste börja arbeta.
Vad gäller interferoner är allt mycket komplicerat här:

Dessutom börjar speciella immunoglobulinceller, B-lymfocyter, producera speciella immunoglobuliner (vanligen kallade antikroppar), som blockerar virusets proteiner och förvandlar dem till hjälplösa mål för makrofager.

Immunoglobuliner i klasserna A, M, G (IgA, IgM, IgG) eller antikroppar - proteiner som produceras av kroppens immunsystem som svar på införandet av bakterier, virus, svampar och andra främmande medel (antigener).

Antikroppar är specifika och produceras för varje specifikt antigen. Produktionen av immunglobuliner åtföljs av en allergisk reaktion. Vid autoimmuna sjukdomar produceras antikroppar mot sina egna vävnader..

Det finns fem klasser av antikroppar, av vilka IgA, IgG och IgM är av det största diagnostiska värdet..

IgA-antikroppar syntetiseras i luftvägarna, mag-tarmkanalen, vagina och andra organ. Dessa antikroppar skyddar kroppen från invasionen av främmande agens från utsidan. Immunglobuliner i klass A svarar för 10-15% av alla antikroppar. Hos ett litet antal människor produceras inte IgA-antikroppar - selektiv immunoglobulin A-brist.

IgM-antikroppar finns i blodet och lymfvätskan. När ett antigen kommer in är det immunglobuliner M som produceras i första hand. IgM-antikroppsnivå är 5-10%.

IgG-antikroppar finns i alla kroppsvätskor. De är de minsta, men vanligaste antikropparna (cirka 75-80% av alla immunoglobuliner i kroppen). Endast IgG-antikroppar kan tränga igenom moderkakan hos en gravid kvinna, och därför skydda fostret - fram till cirka 6 månaders ålder.

En låg nivå av immunglobuliner kan indikera brist på immunsystemet. En ökad mängd immunglobuliner kan produceras i multipelt myelom (IgG, IgA), makroglobulinemi (IgM), primär systemisk amyloidos och andra tillstånd.
Hur antikroppar fungerar:

Vanligtvis ser det ut så här:

Efter att ha genererat tillräckligt med IgG-antikroppar har du nu långsiktig immunitet mot viruset!
Det tar kroppen vanligtvis 10-14 dagar! Om du inte dog under de första 5-8 dagarna har du en god chans att återhämta sig!
(undantag - personer med aids, narkotikamissbrukare, alkoholister, svältande människor samt människor som lever under ogynnsamma miljöförhållanden)

Nu hoppas jag att alla förstår varför vi har så många människor som har återhämtat sig från coronavirus och varför alla är i karantän i exakt 2 veckor.?

Fortune telling på antikroppar. Hur du kontrollerar om du är immun mot coronavirus

Det uppriktigt konstiga uttalandet ”coronavirus är ett falskt” ersattes av ett annat, inte mindre optimistiskt - ”Jag blev redan sjuk.” De flesta människor som inte ens åkte till utlandet och inte hade någon kontakt med de sjuka hoppades inifrån att "den utdragna bronkit på vintern var milt coronavirus". Idag fanns det en möjlighet att ta reda på det.

"Har du ett coronavirus för tillfället, kan du ta reda på det med hjälp av en PCR-studie (och för detta måste du göra en vattpinne från oropharynx)," säger Elena Chashikhina, chef för det kliniska diagnostiska laboratoriet INVITRO-Moskva. - För att ta reda på om du har stött på viruset tidigare måste du donera blod för att utföra en enzymbunden immunosorbentanalys (ELISA), som visar om du har antikroppar (immunoglobuliner, Ig) mot coronavirus.

Antikroppar finns i olika klasser. En hög nivå av antikroppar av klass M (IgM) indikerar att koronavirusinfektion i kroppen är närvarande eller befann sig i det närmaste förflutna (dessa antikroppar produceras i genomsnitt en vecka efter att viruset invaderar kroppen och försvinner vanligtvis efter tre månader). En ökad nivå av antikroppar av klass G (IgG) är ett tecken på att en person redan har överfört COVID-19, vilket innebär att han kan vara immun mot denna sjukdom. ”.

Om en PCR-studie bara kan vara klar nästa dag (detta är idealiskt, men i praktiken, som vi redan vet, måste patienter vänta på resultaten av testerna i mer än en vecka, eftersom positiva test kräver en lång verifiering), då ett uttryckligt antikroppstest ( vilket bara det faktum att deras närvaro kommer att visa) tar 15-30 minuter. En fullfjädrad studie som kan visa nivån av antikroppar i vissa enheter - en indikator på immunitetens spänning (styrka) - kräver längre tid, minst cirka två timmar.

Bara SARS

Hur berättigade är förhoppningarna att vissa av våra invånare redan har överfört koronavirus i asymptomatisk form?

För att besvara denna fråga genomfördes en studie av frivilliga för närvaro av immunitet mot coronavirus..

”Vi mätte nivån av antikroppar i olika grupper av människor: de som släpptes från sjukhuset efter behandling för coronavirusinfektion, personer som hade lunginflammation när de testades negativt för COVID-19 och frivilliga som de trodde hade överfört viruset tidigare hur metoderna för dess diagnos verkade för alla, förklarar Andrey Isaev, chef för DNOCOM Center for Molecular Genetic Research. - Studiedeltagarna fyllde ut enkäter så att vi kunde analysera hur koncentrationen av antikroppar mot coronavirus förändras över tid och förstå hur ihållande immunitet ger sjukdomen.

Resultatet blev tyvärr inte forskarna. Antikroppar mot coronavirus hittades endast i två frivilliga. En av dem var kontakt (coronavirusinfektion diagnostiserades i hans familj), den andra fick lunginflammation med en typisk bild av frostat glas på en CT-scan.

Det verkar som att enheter är immun mot coronavirus idag. ”.

Den mest obehagliga upptäckten var att, som det visade sig, antikropparna i blodet hos människor som genomgick covid i en mild och asymptomatisk form är ganska låg. Detta kan indikera att endast kortvarig immunitet utvecklas för coronavirusinfektion, vilket kan skydda mot återinfektion endast under innevarande säsong. Men forskare, liksom alla oss, hoppas att detta antagande inte bekräftas

Det är emellertid inte meningsfullt att införa immunpass (som vissa länder avser att ge ut till personer som har haft coronavirus för obehindrad rörelse både runt om i landet och runt om i världen).

Bevist att tro?

Hur tillförlitliga är tester för antikroppar mot coronavirus? Faktum är att PCR-diagnostik har kompromitterat sig själva så mycket att även hälsominister Mikhail Murashko tvingades erkänna: datortomografi i lungorna är den enda pålitliga metoden för att diagnostisera coronavirusinfektion..

"Med tillförlitlighet i laboratoriediagnostik menar vi klinisk specificitet (procent av negativa resultat som uppnås bland uppenbara friska människor) och känslighet (procentandel positiva resultat som uppnåtts bland uppenbarligen sjuka personer med en bekräftad diagnos) av testet," förklarar Chashchina. - Problemet med PCR-diagnostik är inte specificitet eller känslighet (de utgör 95-97%), men oftast antingen preanalysfel (det vill säga, utstrykningen togs felaktigt, med försämringar, placerades i fel provrör för transport till laboratoriet) eller i användning okertifierade testsystem. Exempelvis utförs en smet endast från nasopharynx, men viruset bor i denna lokalisering i 2-3 dagar, varefter det sjunker lägre, därför är orofarynx en mer specifik lokalisering för att ta smet. En utstryk som endast tas från nasopharynx kan komma negativt..

När det gäller ELISA-studien är här specificiteten och känsligheten för mer än 95%. Därför, om det finns antikroppar i blodet, är det troligt att de upptäcks. ”.

antikroppar

Vår kropp är inte alls försvarslös mot en mängd bakterier, virus, protozoer och andra influenser. Under århundradena har han lärt sig att hantera "fiender" som försöker komma in. Kroppens försvar kallas immunitet. Immunitet delas in i cellulär och humoral. Antikroppar är de viktigaste "soldaterna" för humoral immunitet..

Vad är antikroppar och deras typer

Antikroppar är proteiner från blodserum (immunoglobuliner - Ig) och andra biologiska vätskor som produceras som svar på införandet av främmande organiska substanser (antigener). Antikroppar har förmågan att interagera med antigenen som orsakade deras bildning. Efter att ha kombinerat med antikroppen avlägsnas antigenet från kroppen. Utseendet i patientens blod av antikroppar mot det orsakande medlet för en viss infektion indikerar uppkomsten av immunitet mot denna infektion, och mängden antikroppar indikerar dess spänning..

Skill mellan fullständiga och ofullständiga antikroppar. Kompletta antikroppar i kombination med antigen ger synliga reaktioner (koagulering i form av flingor). Ofullständiga antikroppar (till exempel antikroppar mot Rh-faktorn i blodet) ger inte sådana reaktioner, de upptäcks med andra metoder.

Naturliga antikroppar produceras i humana krokanter vid kontakt med bakterier (men sjukdomen förekommer inte). Således uppstår till exempel individuell immunitet mot vissa infektioner vid kontakt med patienter. Antikroppar produceras också för införande av vacciner som innehåller komponenter av bakterier eller virus..

immunoglobuliner

Immunoglobuliner är blodproteiner som har antikroppsaktivitet, de utgör ungefär en tredjedel av alla serumproteiner och antalet ökar efter att antigen kommer in i kroppen. Antikroppar kan tillhöra någon av de fem klasserna av immunoglobuliner: IgA, IgG, IgM, IgD, IgE.

Immunoglobulin G är den huvudsakliga klassen av antikroppar och står för cirka två tredjedelar av alla serumimmunglobuliner. Efter den initiala administreringen av antigen bildas den senare än IgM-antikroppar, men efter upprepad administrering av antigen, tidigare. IgG är den enda klassen antikroppar som kan passera placenta och ge immunologiskt skydd för fostret. På grund av det höga halten serum är IgG av största vikt vid anti-infektiös immunitet, därför bedöms effektiviteten av vaccination utifrån dess närvaro i blodserumet..

Mängden immunglobulin M i blodserumet är mindre, ungefär en tiondel av alla immunoglobuliner. Antikroppar i denna klass bildas när ett antigen först kommer in i kroppen..

Immunoglobulin A står för cirka en sjunde av alla immunoglobuliner i serum. Det kan existera i saliv, lakrimal vätska, näs- och bronkialutsöndring, på ytan av slemhinnan i mag-tarmkanalen i form av ett sekretoriskt immunglobulinresistent mot effekterna av enzymer. IgA förhindrar inträde av mikroorganismer där de oftast kommer in i kroppen. Mängden IgA ökar med andningssjukdomar, till exempel med bronkialastma.

Immunoglobulin E finns i serum i mycket små mängder. Det är mycket aktivt i förhållande till sina egna celler i människokroppen, dess interaktion med sådana celler orsakar frisättning av histamin (huvudkomponenten i allergiska reaktioner) och utvecklingen av en omedelbar typ av allergisk reaktion (från urticaria till anafylaktisk chock).

Immugoglobulin D finns också i små mängder i blodet.

Hur antikroppar görs

Produktionen av antikroppar som svar på intaget av antigen i kroppen beror på om kroppen först eller flera gånger möter detta antigen. Vid det första mötet visas antikroppar inte omedelbart, men efter några dagar, samtidigt, bildas IgM-antikroppar först, och sedan börjar IgG-antikroppar råda. Antalet antikroppar i blodet når sin topp på cirka en vecka, då minskar antalet långsamt.

Med upprepad inträde av antigen i kroppen sker antikroppsproduktion snabbare och i en större volym, med omedelbart bildande av IgG-antikroppar. Immunsystemet kan komma ihåg sina möten med vissa antigener under mycket lång tid, vilket förklarar till exempel livslång immunitet mot smittkoppor eller barninfektioner..

Vad är immunserum

Sera som innehåller antikroppar kallas immunsera. De används ofta för behandling och förebyggande av infektionssjukdomar. Speciellt effektivt är användningen av antitoxiska antikroppar som interagerar med toxiner (gifter) från bakterier. Ett exempel på sådana sera är difteri och stivkrampserum..

Antikroppar är våra skyddare som förhindrar att bakterier och virus fritt kommer in i vår kropp..

Galina Romanenko
"Women's Journal of Women's Health Womenhealthnet"

ANTIKROPPAR

Antikroppar är proteiner från globulinfraktionen av humant blodserum och varmblodiga djur som bildas som svar på införandet av olika antigener (bakterier, virus, proteintoxiner, etc.) i kroppen och interagerar specifikt med antigenen som fick dem att bildas. Genom att binda till de aktiva ställena (centra) med bakterier eller virus, förhindrar antikroppar deras reproduktion eller neutraliserar de giftiga ämnena som frisätts av dem. Närvaron av antikroppar i blodet indikerar att kroppen interagerade med antigenet mot den sjukdom den orsakar. I vilken utsträckning immuniteten beror på antikroppar och i vilken utsträckning antikroppar endast åtföljer immunitet bestäms i relation till en specifik sjukdom. Bestämning av antikropparnivån i blodserumet gör att vi kan bedöma immunitetsintensiteten även i de fall då antikropparna inte spelar en avgörande skyddande roll.

Den skyddande effekten av antikroppar som finns i immunsera används ofta vid behandling och förebyggande av infektionssjukdomar (se Seroprofylax, seroterapi). Antikroppsreaktioner med antigener (serologiska reaktioner) används för diagnos av olika sjukdomar (se serologiska studier).

Innehåll

Berättelse

Under lång tid om kemikalien. naturen av A. visste väldigt lite. Det är känt att antikroppar efter antigenadministrering finns i blodserum, lymf, vävnadsextrakt och att de specifikt reagerar med deras antigen. Närvaron av antikroppar bedömdes på grundval av de synliga aggregaten som bildas vid interaktion med antigenet (agglutination, utfällning) eller genom en förändring av antigenets egenskaper (neutralisering av toxinet, celllys), men nästan ingenting var känt till vilket kemiskt substrat av antikropparna.

Tack vare appliceringen av ultracentrifugering, immunelektrofores och proteinrörlighet i det isoelektriska fältet har antikroppar visat sig tillhöra klassen gamma-globuliner eller immunoglobuliner.

Antikroppar är normala globuliner förformade under syntesen. Immunglobuliner erhållna genom immunisering av olika djur med samma antigen och vid immunisering av samma djurart med olika antigen har olika egenskaper, precis som serumglobuliner av olika djurarter inte är desamma..

Klasser av immunglobuliner

Immunoglobuliner produceras av immunkompetenta celler i lymfoida organ, de skiljer sig i molekylvikt, sedimentationskonstant, elektroforetisk mobilitet, kolhydratinnehåll och immunologisk aktivitet. Det finns fem klasser (eller typer) av immunglobuliner:

Immunoglobuliner M (IgM): molekylvikt på cirka 1 miljon, har en komplex molekyl; den första som dyker upp efter immunisering eller antigenstimulering, har en skadlig effekt på mikrober som kommer in i blodomloppet, bidrar till deras fagocytos; svagare än immunoglobuliner G, binder lösliga antigener, bakterietoxiner; förstörs i kroppen 6 gånger snabbare än immunoglobuliner G (till exempel hos råttor är halveringstiden för immunoglobulin M 18 timmar, och den för immunoglobulin G är 6 dagar).

Immunoglobuliner G (IgG): molekylvikt på cirka 160 000, de anses vara standard, eller klassiska, antikroppar: de passerar lätt genom moderkakan; bildas långsammare än IgM; binder mest effektivt lösliga antigener, särskilt exotoxiner, såväl som virus.

Immunoglobuliner A (IgA): molekylvikter på cirka 160 000 eller mer, produceras av lymfvävnaden i slemhinnorna, hämmar nedbrytningen av enzymer i kroppens celler och motstår de patogena effekterna av tarmkim, penetrerar lätt kroppens cellbarriärer, finns i kolostrum, saliv, tårar och tarmslem, svett, separerad av näsan, i blodet är i mindre mängder, lätt anslutna till kroppens celler; IgA dök uppenbarligen i utvecklingsprocessen för att skydda slemhinnorna från aggression av bakterier och för att överföra passiv immunitet till avkommor.

Immunoglobuliner E (IgE): molekylvikt av cirka 190 000 (enligt R. S. Nezlin, 1972); tydligen är de allergiska antikroppar - de så kallade reagenserna (se nedan).

Immunoglobuliner D (IgD): molekylvikt av cirka 180 000 (enligt R. S. Nezlin, 1972); mycket känt är för närvarande.

Antikroppsstruktur

En immunoglobulinmolekyl består av två icke-identiska polypeptidsubenheter - lätta (L - från engelska lätta) kedjor med en molekylvikt av 20 000 och två tunga (H - från engelska tunga) kedjor med en molekylvikt av 60 000. Dessa kedjor, kopplade till disulfidbroar, bildar huvudmonomeren LH. Men i det fria tillståndet förekommer sådana monomerer inte. De flesta immunglobulinmolekyler består av dimerer (LH)2, resten är från polymerer (LH)2n. De huvudsakliga N-terminala aminosyrorna i humant gammaglobulin är asparagin och glutamik och kanin - alanin och asparaginsyra. Porter (RR Porter, 1959), verkade på papainimmunoglobuliner, fann att de sönderdelas i två (I och II) Fab-fragment och ett Fc-fragment (III) med en sedimentationskonstant på 3,5S och en molekylvikt av cirka 50 000. kolhydrater bundna till Fc-fragmentet. På förslag från WHO-experter fastställdes följande nomenklatur av antikroppsfragment: Fab-fragment - monovalent, aktivt anslutande till antigenet; Fc-fragment - interagerar inte med antigenet och består av C-terminala halvor av tunga kedjor; Fd-fragment är ett tungkedjeställe som är en del av Fab-fragmentet. Ett fragment av pepsinhydrolys av 5S föreslås beteckna F (ab)2, och det monovalenta 3,5S-fragmentet är Fab.

Antikroppspecificitet

En av de viktigaste egenskaperna hos antikroppar är deras specificitet, vilket uttrycks i det faktum att antikroppar mer aktivt och mer fullständigt interagerar med antigenet som kroppen stimulerades med. Antigen-antikroppskomplexet i detta fall har den största styrkan. Antikroppar kan skilja små förändringar i struktur i antigen. När man använder konjugerade antigener som består av ett protein och den inkluderade enkla kemiska substansen - hapten, är de resulterande antikropparna specifika för hapten, protein och protein-hapten-komplexet. Specificiteten beror på den kemiska strukturen och det rumsliga mönstret hos antideterminanterna för antikroppar (aktiva centra, reaktiva grupper), det vill säga delarna av antikropparna genom vilka de ansluter till antigenens determinanter. Antalet antideterminanter av antikroppar kallas ofta deras valens. Så, en IgM-antikroppsmolekyl kan ha upp till 10 valenser; IgG- och IgA-antikroppsmolekyler är tvåvärda.

Enligt Karash (F. Karush, 1962) består aktiva IgG-centra av 10–20 aminosyrarester, vilket är ungefär 1% av alla aminosyror i en antikroppsmolekyl, och enligt Winkler (M. N. Winkler, 1963) består aktiva centra av från 3-4 aminosyrarester. Tyrosin, lysin, tryptofan och andra hittades i deras komposition. Antidbestämningsmedel finns uppenbarligen i de aminoterminala halvorna av Fab-fragment. Variabla segment av lätta och tunga kedjor är involverade i bildandet av det aktiva centrumet, där det senare spelar en viktig roll. Kanske är den lätta kedjan endast delvis involverad i bildandet av det aktiva centrum eller stabiliserar strukturen hos tunga kedjor. Den mest kompletta antideterminanten skapas endast av en kombination av lätta och tunga kedjor. Ju fler matchande punkter det finns mellan antideterminanterna för antikropparna och antigenens determinanter, desto högre är specificiteten. Olika specificitet beror på sekvensen av aminosyrarester i det aktiva mitten av antikroppar. Kodningen av en enorm mängd antikroppar efter deras specificitet är oklar. Porter möjliggör tre möjligheter till specificitet.

1. Bildningen av den stabila delen av immunoglobulinmolekylen kontrolleras av en gen och den variabla delen av tusentals gener. De syntetiserade peptidkedjorna kombineras till en immunoglobulinmolekyl under påverkan av en speciell cellulär faktor. Antigenet fungerar i detta fall som en faktor som utlöser syntesen av antikroppar.

2. Immunoglobulinmolekylen kodas av stabila och variabla gener. Under perioden för celldelning inträffar en rekombination av variabla gener som bestämmer deras mångfald och variationen i delar av globulinmolekyler.

3. Genen som kodar för den variabla delen av immunoglobulinmolekylen skadas av ett specifikt enzym. Andra enzymer reparerar skador, men på grund av fel tillåter en annan sekvens av nukleotider inom en given gen. Detta beror på den olika aminosyrasekvensen i den variabla delen av immunoglobulinmolekylen. Det finns till exempel andra hypoteser. Burnet (F. M. Burnet, 1971).

Heterogenitet (heterogenitet) hos antikroppar manifesteras på många sätt. Som svar på administreringen av ett enda antigen bildas antikroppar som skiljer sig i affinitet för antigenet, antigena determinanter, molekylvikt, elektroforetisk mobilitet och N-terminala aminosyror. Gruppantikroppar mot olika mikrober orsakar korsreaktioner på olika typer och typer av salmonella, shigella, Escherichia, animaliska proteiner, polysackarider. De producerade antikropparna är heterogena i sin specificitet med avseende på ett homogent antigen eller en enda antigen determinant. Heterogeniteten hos antikroppar noterades inte bara mot protein- och polysackaridantigener, utan också mot komplexa, inklusive konjugerade, antigener och mot haptener. Det antas att antikroppsheterogenitet bestäms av den kända mikroheterogeniteten hos antigen-determinanter. Heterogenitet kan orsakas av bildandet av antikroppar mot antigen-antikroppskomplexet, som observeras under upprepad immunisering, skillnaden i cellerna som utgör antikropparna, och även tillhörande av antikroppar till olika klasser av immunoglobuliner, som, liksom andra proteiner, har en komplex genetiskt kontrollerad antigenstruktur.

Typer av antikroppar

Kompletta antikroppar har minst två aktiva centra och, i kombination med antigener in vitro, orsakar synliga reaktioner: agglutination, utfällning, komplementbindning; neutralisera gifter, virus, opsonisera bakterier, orsaka ett visuellt fenomen av immunvidhäftning, immobilisering, kapselsvullnad, blodplättbelastning. Reaktionerna fortsätter i två faser: specifik (interaktion mellan en antikropp med ett antigen) och icke-specifikt (ett eller annat av ovanstående fenomen). Det är allmänt erkänt att olika serologiska reaktioner bestäms av en, inte ett flertal antikroppar, och beror på formuleringstekniken. Det finns termiska kompletta antikroppar som reagerar med antigenet vid t ° 37 ° och kall (kryofil), som visar en effekt vid t ° under 37 °. Det finns också antikroppar som reagerar med antigenet vid låg temperatur och den synliga effekten manifesteras vid t ° 37 °; dessa är bifasiska, biotermala antikroppar, till vilka Donat - Landsteiner-hemolysiner tilldelas. Alla kända klasser av immunglobuliner innehåller kompletta antikroppar. Deras aktivitet och specificitet bestäms av titer, aviditet (se Aviditet) och antalet antideterminanter. IgM-antikroppar är mer aktiva än IgG-antikroppar vid hemolys och agglutineringsreaktioner.

Ofullständiga antikroppar (icke-utfällande, blockerande, agglutinoider), liksom kompletta antikroppar, kan binda till motsvarande antigen, men reaktionen åtföljs inte av fenomenet utfällning, agglutination etc., synlig in vitro.

Ofullständiga antikroppar hittades hos människor 1944 mot Rh-antigenet, de hittades i virus-, rickettsial- och bakterieinfektioner med avseende på toxiner i olika patologiska tillstånd. Det finns några bevis på skillnaden mellan ofullständiga antikroppar. Bakteriella ofullständiga antikroppar har skyddande egenskaper: antitoxiskt, opsoniserande, bakteriologiskt; samtidigt hittades ofullständiga antikroppar i ett antal autoimmuna processer - med blodsjukdomar, särskilt hemolytisk anemi.

Ofullständiga hetero-, iso- och autoantikroppar kan orsaka cellskador och spelar också en roll i förekomsten av läkemedelsinducerad leuko- och trombocytopeni

Antikroppar som vanligtvis finns i blodserum hos djur och människor i frånvaro av en klar infektion eller immunisering anses vara normala (naturliga) antikroppar. Ursprunget till normala antibakteriella antikroppar kan associeras, i synnerhet, med antigenstimulering av kroppens normala mikroflora. Dessa synpunkter är teoretiskt och experimentellt underbyggda av studier på djur gnotobionts och nyfödda i normala levnadsförhållanden. Frågan om funktionerna hos normala antikroppar är direkt relaterad till specificiteten av deras verkan. L. A. Zilber (1958) ansåg att individuell resistens mot infektioner och dessutom ”kroppens immunogen beredskap” bestäms av deras närvaro. De normala antikropparnas roll i blodbaktericid aktivitet i opsonisering under fagocytos visas. Många forskares arbete har visat att normala antikroppar huvudsakligen är makroglobuliner - IgM. Vissa forskare har hittat normala antikroppar i IgA- och IgG-klasserna av immunoglobuliner. De kan innehålla antingen ofullständiga eller kompletta antikroppar (normala antikroppar mot röda blodkroppar - se blodgrupper).

Antikroppssyntes

Antikroppssyntes fortsätter i två faser. Den första fasen är induktiv, latent (1-4 dagar), i vilken antikroppar och antikroppsbildande celler inte detekteras; den andra fasen är produktiv (börjar efter den induktiva fasen), antikroppar finns i plasmaceller och vätska som rinner från lymfoida organ. Efter den första fasen av antikroppsbildning börjar en mycket snabb tillväxthastighet av antikroppar, ofta kan deras innehåll fördubblas var 8: e timme eller ännu snabbare. Den maximala koncentrationen av olika antikroppar i blodserumet efter en enda immunisering registreras den 5: e, 7: e, 10: e eller 15: e dagen; efter injektion av deponerade antigener - den 21-30 eller 45: e dagen. Efter 1-3 månader eller mer sjunker antikroppstitrar kraftigt. Men ibland registreras en låg nivå av antikroppar efter immunisering i blodet under flera år. Det visade sig att primär immunisering med ett stort antal olika antigen åtföljs av uppkomsten av initialt tunga IgM (19S) antikroppar, sedan under en kort tid - IgM och IgG (7S) antikroppar och slutligen några lätta 7S antikroppar. Upprepad stimulering av den sensibiliserade organismen med ett antigen påskyndar bildandet av båda klasser av antikroppar, förkortar den latenta fasen av antikroppsbildning, syntestiden för 19S antikroppar och främjar den föredragna syntesen av 7S antikroppar. Ofta visas 19S-antikroppar inte alls.

Markerade skillnader mellan den induktiva och den produktiva fasen vid antikroppsbildning bildas när man studerar deras känslighet för ett antal påverkningar, vilket är av grundläggande betydelse för att förstå arten av specifik profylax. Exempelvis är det känt att exponering före immunisering försenar eller fullständigt hämmar bildning av antikroppar. Bestrålning i reproduktionsfasen av antikroppsbildning påverkar inte innehållet av antikroppar i blodet.

Isolering och rening av antikroppar

För att förbättra metoden för isolering och rening av antikroppar har immunosorbenter föreslagits. Metoden är baserad på omvandlingen av lösliga antigen till olöslig genom att fästa dem genom kovalenta bindningar till en olöslig bas från cellulosa, Sephadex eller en annan polymer. Metoden tillåter erhållande av mycket renade antikroppar i stora mängder. Processen för isolering av antikroppar med användning av immunosorbenter inkluderar tre steg:

1) extraktion av antikroppar från immunserum;

2) tvättning av immunosorbenten från icke-specifika proteiner;

3) klyvning av antikroppar från det tvättade immunosorbenten (vanligtvis med buffertlösningar med låga pH-värden). Förutom denna metod är andra metoder för rening av antikroppar också kända. De kan delas in i två grupper: specifika och icke-specifika. Den första är baserad på dissociation av antikroppar från komplexet av olösligt antigen - antikropp (fällning, agglutinat). Det utförs av olika ämnen; en utbredd metod för enzymatisk matsmältning av antigen eller flockningstoxin - antitoxinamylas, trypsin, pepsin. Termisk eluering används också vid t ° 37–56 °.

Icke-specifika metoder för antikroppsrening baseras på isolering av gammaglobuliner: gelelektrofores, kromatografi på jonbyteshartser, fraktionering genom gelfiltrering genom Sephadex. Fällningsmetoden med natriumsulfat eller ammonium är allmänt känd. Dessa metoder är tillämpliga i fall av höga koncentrationer av antikroppar i serum, till exempel med hyperimmunisering..

Gelfiltrering genom Sephadex såväl som användning av jonbyteshartser möjliggör separering av antikroppar efter storleken på deras molekyler.

Användning av antikroppar

Antikroppar, speciellt gammaglobuliner, används för behandling och förebyggande av difteri, mässling, stivkrampa, gasbrist, miltbrand, leptospiros, mot stafylokocker, rabies, influensa och andra. Speciellt framställda och renade diagnostiska sera används vid serologisk identifiering av patogener (se patogener). Mikrobiell identifiering). Det visade sig att pneumokocker, stafylokocker, salmonella, bakteriofager, etc., adsorberande motsvarande antikroppar, vidhäftar blodplättar, erytrocyter och andra främmande partiklar. Detta fenomen kallas immunhäftning. Det har visats att proteinreceptorer för blodplättar och erytrocyter, som förstörs av trypsin, papain och formalin, spelar en roll i mekanismen för detta fenomen. Reaktionen av immunhäftning beror på temperaturen. Det beaktas av vidhäftningen av ett corpuskulärt antigen eller genom hemagglutination på grund av ett lösligt antigen i närvaro av antikroppar och komplement. Reaktionen är mycket känslig och kan användas både för att bestämma komplement och mycket små (0,005-0,01 μg kväve) antikroppar. Immunadhesion förbättrar leukocyt fagocytos.

Moderna teorier om antikroppsbildning

Det finns instruktiva teorier om antikroppsbildning, enligt Krim är antigenet direkt eller indirekt involverat i bildandet av specifika immunoglobuliner, och teorier som involverar bildandet av genetiskt redan existerande antikroppar mot alla möjliga antigener eller celler som syntetiserar dessa antikroppar. Dessa inkluderar selektionsteorier och teori om repression - derepression, som möjliggör syntes av antikroppar av en cell. Teorier föreslås också som syftar till att förstå processerna för det immunologiska svaret på nivån för hela organismen, med hänsyn till interaktion mellan olika celler och allmänt accepterade idéer om proteinsyntes i kroppen..

Teorin om den direkta Gaurowitz-Pauling-matrisen reducerar till det faktum att antigenet, som kommer in i cellerna som producerar antikroppar, spelar rollen som en matris som påverkar bildningen av en immunoglobulinmolekyl från peptidkedjor, vars syntes fortsätter utan antigenens deltagande. Antigen "intervention" inträffar endast i den andra fasen av bildandet av proteinmolekylen - fasen för vridning av peptidkedjorna. Antigenet ändrar de terminala N-aminosyrorna för den framtida antikroppen (immunoglobulin eller dess individuella peptidkedjor) så att de blir komplementära till antigenets determinanter och lätt kommer i kontakt med det. Den sålunda bildade antikroppen klyvs från antigenet, kommer in i blodomloppet och det frisatta antigenet deltar i bildandet av nya antikroppsmolekyler. Denna teori har tagit upp ett antal allvarliga invändningar. Det kan inte förklara bildandet av immunologisk tolerans; en överlägsen mängd antikropp producerad av cellen per tidsenhet av antalet antigenmolekyler som är många gånger mindre i den; varaktigheten av antikroppsproduktionen i kroppen, beräknad under åren eller genom hela livet, jämfört med en betydligt kortare antigenretentionstid i celler, etc. Det bör också noteras att plasma eller lymfoida celler som producerar antikroppar inte assimilerar antigenet, även om närvaron av ett nativt antigen eller fragment i antikroppssyntetiserande celler kan inte helt uteslutas. Nyligen föreslog Gaurowitz (F. Haurowitz, 1965) ett nytt koncept, enligt vilket antigenet inte bara förändrar den sekundära, utan också den primära strukturen för immunoglobulin.

Den indirekta matristeorin Burnet - Fenner fick beröm 1949. Dess författare trodde att antigenmakromolekyler och troligtvis dess determinanter tränger in i kärnorna i groddcellerna och orsakar ärftligt fixerade förändringar i dem, vars resultat är bildandet av antikroppar mot detta antigen. En analogi är tillåten mellan den beskrivna processen och transduktion i bakterier. Den nya kvaliteten på bildandet av immunglobuliner som förvärvats av celler överförs till avkommor från celler i otaliga generationer. Frågan om antigenens roll i den beskrivna processen var emellertid kontroversiell..

Det var denna omständighet som orsakade teorin om det naturliga urvalet av Erne (K. Jerne, 1955).

Teorin om naturligt urval Erne. Enligt denna teori är ett antigen inte en matris för syntes av antikroppar och orsakar inte genetiska förändringar i antikroppsproducerande celler. Dess roll reduceras till valet av befintliga "normala" antikroppar som spontant uppstår för olika antigener. Detta händer som om: antigenet, som har kommit in i kroppen, hittar motsvarande antikropp, kombinerar med det; det resulterande antigen-antikroppskomplexet absorberas av celler som producerar antikroppar, och det senare får ett incitament att producera antikroppar av denna typ.

Burnets klonala selektionsteori (F. Burnet) var en vidareutveckling av Ernes idé om selektion, men inte om antikroppar, utan av celler som producerar antikroppar. Burnet anser att som ett resultat av den allmänna processen för differentiering i de embryonala och postnatala perioderna bildas många kloner av lymfoida eller immunologiskt kompetenta celler från mesenkymala celler som kan reagera med olika antigener eller deras determinanter och producerar antikroppar - immunoglobuliner. Arten av lymfoidcells svar på ett antigen under de embryonala och postnatala perioderna är annorlunda. Embryot producerar antingen inte globuliner alls eller syntetiserar dem lite. Det antas emellertid att de cellkloner som kan reagera med de antigena determinanterna för sina egna proteiner reagerar med dem och förstörs som ett resultat av denna reaktion. Så celler som bildar anti-A-agglutininer hos personer med blodgrupp A och anti-B-agglutininer hos personer med blodgrupp B. Där kommer de att dö. Om du introducerar antigen till embryot kommer det att förstöra motsvarande cellklon på samma sätt. och den nyfödda under nästa liv kommer teoretiskt att vara tolerant mot detta antigen. Processen att förstöra alla kloner av celler till sina egna proteiner i embryot slutar vid tidpunkten för dess födelse eller utgång från ägget. Nu har den nyfödda bara "sin egen", och han känner igen alla "främmande" som har kommit in i hans kropp. Burnet tillåter också bevarande av "förbjudna" kloner av celler som kan reagera med autoantigener av organ som under utveckling isolerades från celler som producerar antikroppar. Erkännandet av "främmande" säkerställs av de återstående klonerna av mesenkymceller, på vilken ytan finns motsvarande antideterminanter (receptorer, cellulära antikroppar), komplementära till bestämningarna av det "främmande" antigenet. Typen av receptorerna bestäms genetiskt, det vill säga kodas på kromosomerna och införs inte i cellen tillsammans med antigenet. Närvaron av färdiga receptorer leder oundvikligen till reaktionen av denna klon av celler med detta antigen, vars följd nu är två processer: bildning av specifika antikroppar - immunoglobuliner och multiplikation av celler i denna klon. Burnet medger att en mesenkymcell som har fått antigenstimulering, i ordning av mitos, ger upphov till en population av dotterceller. Om en sådan cell har bosatt sig i lymfkörtelns medulla, ger den upphov till bildandet av plasmaceller, när den sätter sig i lymffolliklarna - till lymfocyterna, i benmärgen - till eosinofiler. Dotterceller är benägna att somatiska irreversibla mutationer. Vid beräkning av hela organismen kan antalet muterande celler per dag vara 100 000 eller 10 miljoner, och därför kommer mutationer att ge cellkloner till antigen. Burnets teori väckte stort intresse bland forskare och ett stort antal verifieringsexperiment. Det viktigaste beviset för teorin var bevisen på närvaron av antikroppliknande immunoglobulinreceptorer på föregångarna till antikroppsproducerande celler (benmärgs-härledda lymfocyter) och närvaron av en intercistronisk uteslutningsmekanism i antikroppsproducerande celler i förhållande till antikroppar med olika specificitet.

Teorin om förtryck och derepression formulerades av L. Szilard 1960. Enligt denna teori kan varje cell som producerar en antikropp potentiellt syntetisera vilken antikropp som helst mot något antigen, men denna process hämmas av repressorn för det enzym som är involverat i syntesen av immunglobulin. I sin tur kan bildningen av en repressor hämmas av påverkan av antigen. Sylard tror att bildningen av antikroppar styrs av speciella icke-smältbara gener. Deras antal når 10 000 för varje enskild (haploid) uppsättning av kromosomer.

Lederberg (J. Lederberg) anser att det i de gener som ansvarar för syntesen av globuliner finns platser som kontrollerar bildandet av aktiva antikroppscentra. Normalt hämmas funktionen hos dessa ställen, och därför finns det en syntes av normala globuliner. Under påverkan av antigen, såväl som, eventuellt, under påverkan av vissa hormoner, desinficeras och stimuleras platserna för genen som är ansvarig för bildandet av aktiva antikroppscentra och cellen börjar syntetisera immunglobuliner.

Enligt H. N. Zhukov-Verezhnikov (1972) var evolutionära prekursorer för antikroppar skyddande enzymer liknande de som förekom i bakterier med förvärvad antibiotikaresistens. Liksom antikroppar består enzymer av de aktiva (med avseende på underlaget) och passiva delar av molekylen. På grund av dess ekonomi har mekanismen för "ett enzym - ett substrat" ​​ersatts av mekanismen för "enstaka molekyler med en variabel del", det vill säga antikroppar med variabla aktiva centra. Information om antikroppsbildning bildas i "reservgen" -zonen eller i "redundanszon" på DNA. Sådan redundans kan tydligen lokaliseras i kärn- eller plasmid-DNA, som lagrar ”evolutionär information. som spelade rollen som en intern mekanism som "utarbetar" kontrollen av ärftlig variation. " Den här hypotesen innehåller en lärorik komponent, men är inte helt instruktiv..

P.F. Zdrodovsky tilldelar antigen rollen som en repressor för vissa gener som styr syntesen av komplementära antikroppar. Samtidigt irriterar antigen, som Zdrodovsky medger, i enlighet med Selyes teori, adenohypofys, vilket resulterar i produktion av tillväxthormon (STH) och adrenokortikotropa (ACTH) hormoner. STH stimulerar den plasmacytiska och antikroppsbildande reaktionen av lymfoida organ, som i sin tur stimuleras av ett antigen, och ACTH, som verkar på binjurebarken, får det att frisätta kortison. Detta senare i immunsystemet hämmar den plasmacytiska reaktionen av lymfoida organ och antikroppssyntes av celler. Alla dessa bestämmelser bekräftades experimentellt..

Effekten av hypofysen - binjurar systemet på produktionen av antikroppar kan endast detekteras i en tidigare immuniserad kropp. Det är detta system som organiserar anamnestiska serologiska reaktioner som svar på införandet av olika icke-specifika stimuli i kroppen.

En djupgående studie av cellförändringar i processen med det immunologiska svaret och ackumuleringen av ett stort antal nya fakta bekräftade ståndpunkten att det immunologiska svaret endast utförs som ett resultat av samverkan mellan vissa celler. I enlighet med detta föreslås flera hypoteser..

1. Teorin om samarbete mellan två celler. Många fakta har samlats som indikerar att det immunologiska svaret i kroppen utförs under förhållandena för interaktion mellan olika typer av celler. Det finns bevis på att makrofager är de första som assimilerar och modifierar antigenet, men senare "instrueras" lymfoida celler i syntesen av antikroppar. Samtidigt har det visats att samarbete också inträffar mellan lymfocyter som tillhör olika subpopulationer: mellan T-lymfocyter (tymusberoende, antenreaktiv, härrörande från tymuskörteln) och B-celler (tymusoberoende, föregångare till antikroppsbildande celler, benmärgslymfocyter).

2. Teorier om samverkan mellan tre celler. Enligt synpunkter från Roitt (I. Roitt) och andra (1969) fångas och behandlas antigenet av makrofager. Ett sådant antigen stimulerar antigenreaktiva lymfocyter som genomgår transformation till blastoidceller, som ger försenad överkänslighet och förvandlas till celler med lång livslängd i immunologiskt minne. Dessa celler ingår i samarbete med antikroppsbildande stamceller, som i sin tur differentierar sig genom att sprida sig till antikroppsproducerande celler. Enligt Richter (M. Richter, 1969) har de flesta antigen en svag affinitet för antikroppsbildande celler, därför är följande processinteraktion nödvändig för antikroppsproduktion: antigen + makrofag - bearbetat antigen + antigen-reaktiv cell - aktiverat antigen + föregångare för en antikroppsbildande cell - en antikropp. Vid hög antigenaffinitet kommer processen att se ut så här: antigen + föregångare för antikroppsbildande celler - antikroppar. Det antas att under förhållanden med upprepad stimulering med ett antigen kommer den senare direkt i kontakt med en antikroppsbildande eller immunologisk minnecell. Denna position bekräftas av den större strålningsbeständigheten hos det upprepade immunologiska svaret än det primära, vilket förklaras av olika resistens hos cellerna som deltar i det immunologiska svaret. Efter postulering av behovet av samarbete med tre celler i antikroppsgenes tror R.V. Petrov (1969, 1970) att antikroppssyntes endast kommer att ske om stamcellen (föregångaren till den antikroppsbildande cellen) samtidigt tar emot det bearbetade antigenet från makrofagen och immunopoiesinduceraren från den antigenreaktiva cellen, bildas efter dess (antigen-reaktiva cell) stimulering av ett antigen. Om stamcellen endast kommer i kontakt med antigenet som bearbetas av makrofagen, skapas en immunologisk tolerans (se Immunologisk tolerans). Om det endast finns kontakt mellan stamcellen och den antigenreaktiva cellen syntetiseras icke-specifikt immunglobulin. Det antas att dessa mekanismer ligger till grund för inaktivering av osungna stamceller med lymfocyter, eftersom induceraren av immunopoies, som kommer in i den allogena stamcellen, är en antimetabolit för den (syngena celler är celler med ett identiskt genom, allogena celler är av samma typ, med en annan genetisk sammansättning).

Allergiska antikroppar

Allergiska antikroppar är specifika immunoglobuliner producerade genom verkan av allergener hos människor och djur. Detta avser antikroppar som cirkulerar i blodet vid allergiska reaktioner av en omedelbar typ. Det finns tre huvudtyper av allergiska antikroppar: hudkänslig eller reagens; blockering och hemagglutinering. Biologiska, kemiska och fysikalisk-kemiska egenskaper hos allergiska antikroppar hos en person är speciella (tab.).

Dessa egenskaper skiljer sig kraftigt från egenskaperna för utfällande, komplementbindande antikroppar, agglutininer och andra som beskrivs i immunologi.

Reaginer används vanligtvis för att beteckna homologa humankänsliga antikroppar. Detta är den viktigaste typen av allergiska humana antikroppar, vars huvudegenskap är förmågan att genomföra en passiv reaktion med ökad känslighet för huden hos en frisk mottagare (se Prausnitz-Kustner-reaktionen). Reaginer har ett antal karakteristiska egenskaper som skiljer dem från relativt väl studerade immunantikroppar. Många frågor om reagensers egenskaper och deras immunologiska karaktär förblir emellertid olösta. I synnerhet är den olösta frågan homogeniteten eller heterogeniteten hos reagens i den meningen att de tillhör en viss klass immunglobuliner.

Blockering av antikroppar förekommer hos patienter med pollinos i processen med specifik hyposensibiliserande terapi mot antigenet genom vilket hyposensibilisering utförs. Egenskaperna hos denna typ av antikroppar liknar egenskaperna för utfällande antikroppar..

Hemagglutinerande antikroppar förstås vanligen att beteckna serumantikroppar från människor och djur med förmåga att specifikt agglutinera röda blodkroppar kopplade till ett pollenallergen (indirekt eller passiv hemagglutinationsreaktion). Bindningen av ytan av de röda blodkropparna till pollenallergenet uppnås med olika metoder, till exempel med användning av tannin, formalin, två gånger diazotiserad bensidin. Hemagglutinerande antikroppar kan finnas hos personer med överkänslighet mot växtpollen, både före och efter specifik hyposensibiliserande terapi. Under denna terapi sker omvandlingen av negativa reaktioner till positiva eller en ökning av titrarna för hemagglutineringsreaktionen. Hemagglutinerande antikroppar har egenskapen att adsorberas ganska snabbt på röda blodkroppar behandlade med ett pollenallergen, särskilt några av dess fraktioner. Immunosorbenter avlägsnar hemagglutinerande antikroppar snabbare än reagens. Hemagglutinerande aktivitet är också till viss del associerad med hudkänsliga antikroppar, men rollen för hudkänsliga antikroppar i hemagglutination är uppenbarligen liten eftersom det inte finns något samband mellan hudkänsliga och hemagglutinerande antikroppar. Å andra sidan finns det ett samband mellan hemagglutinerande och blockerande antikroppar, både hos individer som är allergiska mot växtpollen och hos friska individer immuniserade med växtpollen. Dessa två typer av antikroppar har många liknande egenskaper. I processen med specifik hyposensibiliseringsterapi sker en ökning av nivån för både denna och en annan typ av antikropp. Hemagglutinerande antikroppar mot penicillin är inte identiska med hudkänsliga antikroppar. Den främsta orsaken till bildandet av hemagglutinerande antikroppar var penicillinbehandling. Uppenbarligen bör hemagglutinerande antikroppar tilldelas gruppen antikroppar som av flera författare kallas "antikroppsvittnen"..

1962 föreslog Shelley (W. Shelley) ett speciellt diagnostiskt test baserat på den så kallade degranuleringen av basofila leukocyter av kaninblod under påverkan av en allergenreaktion med specifika antikroppar. Emellertid är arten av antikropparna som deltar i denna reaktion och deras förhållande till cirkulerande reagens inte väl förstått, även om det finns bevis för en korrelation mellan denna typ av antikropp med nivån av reagens hos patienter med pollinos.

Upprättandet av optimala förhållanden mellan allergen och testserum är praktiskt viktigt, särskilt i studier med allergentyper, information om vilken ännu inte finns i relevant litteratur.

Följande typer av antikroppar kan tillskrivas djurens allergiska antikroppar: 1) antikroppar vid experimentell anafylax; 2) antikroppar vid spontana allergiska sjukdomar hos djur; 3) antikroppar som spelar en roll i utvecklingen av Arthus-reaktionen (som fällning). Under experimentell anafylaxi finns både allmänna och lokala, speciella typer av anafylaktiska antikroppar med egenskapen att passivt sensibilisera huden hos djur av samma art i djurens blod.

Det har visats att anafylaktisk sensibilisering av marsvin med ängspollenallergener från ängspollen åtföljs av cirkulationen av hudkänsliga antikroppar i blodet. Dessa hudkänsliga kroppar har förmågan att utföra homolog passiv hudkänslighet in vivo. Tillsammans med dessa homologa hudkänsliga antikroppar, i allmänhet sensibilisering av marsvin med allergener från ängspollen, cirkulerar antikroppar genom passiv hemagglutination med bis-diazotiserad bensidin i blodet. Hudsensibiliserande antikroppar som utför homolog passiv överföring och har en positiv korrelation med anafylaxi klassificeras som homologa anafylaktiska antikroppar eller homocytotropa antikroppar. Med termen "anafylaktiska antikroppar" tillskriver författarna en ledande roll i anafylaxreaktionen. Studier började dyka upp som bekräftar förekomsten av homocytotropa antikroppar mot proteinantigener och konjugat i olika typer av försöksdjur. Flera författare identifierar tre typer av antikroppar involverade i allergiska reaktioner av den omedelbara typen. Dessa är antikroppar associerade med en ny typ av immunglobulin (IgE) hos människor och liknande antikroppar hos apor, hundar, kaniner, råttor, möss. Den andra typen av antikroppar är antikroppar från marsvinstyp, som kan fixeras på mastceller och isologa vävnader. De skiljer sig åt i ett antal egenskaper, i synnerhet är de mer termostabila. Det antas att antikroppar av IgG-typ också kan vara en andra typ av anafylaktisk antikropp hos människor. Den tredje typen är antikroppar som sensibiliserar heterologa vävnader som tillhör exempelvis marsvin i klass γ2. Hos människor har endast IgG-antikroppar förmågan att sensibilisera marsvinhud.

I djursjukdomar beskrivs allergiska antikroppar till följd av spontana allergiska reaktioner. Dessa antikroppar är termolabila och har hudkänsliga egenskaper..

Ofullständiga antikroppar används inom det medicinska området när man bestämmer antigenen i ett antal isoserologiska system (se blodtyper) för att fastställa blod som tillhör en viss person i fall av brott (mord, sexuella brott, trafikolyckor, kroppsskada, etc.), liksom undersökning av omtvistat faderskap och moderskap. Till skillnad från fulla antikroppar orsakar de inte agglutination av röda blodkroppar i saltlösning. Bland dem skiljer man två typer av antikroppar. Den första av dem är agglutinoider. Dessa antikroppar kan få röda blodkroppar att hålla sig samman i ett protein eller en makromolekylär miljö. Den andra typen av antikropp är kryptagglutinoider, som reagerar i ett indirekt Coombs-test med antihammaglobulinserum.

För att arbeta med ofullständiga antikroppar har ett antal metoder föreslagits, vilka är indelade i tre huvudgrupper.

1. Metoder för conglutination. Det noteras att ofullständiga antikroppar kan orsaka agglutination av röda blodkroppar i ett protein eller makromolekylärt medium. Som sådant medium, använd AB-serum (som inte innehåller antikroppar), bovint albumin, dextran, biogel - speciellt renat gelatin, bringat till neutralt pH med en buffertlösning, etc. (se. Conglutination).

2. Enzymatiska metoder. Ofullständiga antikroppar kan agglutinera röda blodkroppar som tidigare har behandlats med vissa enzymer. För sådan bearbetning används trypsin, ficin, papain, extrakt från brödjäst, protelin, bromelin, etc..

3. Coombs-test med antiglobulinserum (se Coombs-reaktion).

Ofullständiga antikroppar relaterade till agglutinoider kan utöva sin effekt i alla tre grupper av metoder. Antikroppar relaterade till kryptagglutinoider kan inte agglutinera röda blodkroppar, inte bara i saltlösning, utan också i ett makromolekylärt medium, samt blockera dem i det senare. Dessa antikroppar upptäcks endast i indirekt Coombs-test, med hjälp av vilka inte bara antikroppar relaterade till kryptagglutinoider upptäcks, utan också antikroppar som är agglutinoider.

Monoklonala antikroppar

Från ytterligare material, volym 29

Det klassiska sättet att producera antikroppar för diagnostiska och forskningsändamål är att immunisera djur med specifika antigener och därefter erhålla immunsera innehållande antikroppar med den önskade specificiteten. Denna metod har flera nackdelar, främst på grund av det faktum att immunsera inkluderar heterogena och heterogena populationer av antikroppar som skiljer sig i aktivitet, affinitet (affinitet för antigen) och biologisk effekt. Konventionella immunsera innehåller en blandning av antikroppar specifika både för ett givet antigen och för proteinmolekyler som kontaminerar det. Monoklonala antikroppar mottagna med kloner av hybridceller - hybridom representerar en ny typ av immunologiska reagens (se). Den tveksamma fördelen med monoklonala antikroppar är deras genetiskt förutbestämda standard, obegränsad reproducerbarhet, hög känslighet och specificitet. De första hybridomen isolerades i början av 70-talet av 1900-talet, men den verkliga utvecklingen av en effektiv teknik för att skapa monoklonala antikroppar är förknippad med studierna av Köhler och Milypteyn (G. Kohler, S. Milstein), vars resultat publicerades 1975-1976. Under det kommande decenniet utvecklades en ny inriktning inom cellteknik relaterad till produktion av monoklonala antikroppar..

Hybridom bildas genom fusion av lymfocyter från hyperimmuniserade djur med celler transplanterade av plasmacyter av olika ursprung. Hybridom ärver från en av föräldrarna förmågan att producera specifika immunglobuliner, och från den andra förmågan att reproducera sig obegränsat. Klonade populationer av hybridceller kan producera genetiskt homogena immunoglobuliner av en given specificitet under lång tid - monoklonala antikroppar. De mest använda monoklonala antikropparna producerade av hybridom erhållna med användning av den unika muscellinjen MORS 21 (RE).

De oöverkomliga problemen med tekniken för monoklonala antikroppar inkluderar komplexiteten och komplexiteten för att erhålla stabila högproduktiva hybridkloner som producerar monospecifika immunoglobuliner; svårigheten att erhålla hybridom som producerar monoklonala antikroppar mot svaga antigener som inte kan inducera bildningen av stimulerade B-lymfocyter i tillräckliga mängder; brist på vissa egenskaper hos immunsera i monoklonala antikroppar, t.ex. förmågan att bilda fällningar med komplex av andra antikroppar och antigener, på vilka många diagnostiska testsystem är baserade; låg frekvens av fusion av lymfocyter som producerar antikroppar med myelomceller och den begränsade stabiliteten hos hybridom i masskulturer; låg stabilitet under lagring och ökad känslighet hos monoklonala antikroppspreparat för förändringar i pH, inkuberingstemperatur, liksom för frysning, upptining och exponering för kemiska faktorer; svårigheten att få hybridom eller transplanterbara producenter av humana monoklonala antikroppar.

Nästan alla celler i en population av klonade hybridom producerar monoklonala antikroppar av samma klass och underklass av immunoglobuliner. Monoklonala antikroppar kan modifieras med hjälp av metoder för cellulär immunteknik. Således är det möjligt att erhålla "triomer" och "kvadromer" som producerar monoklonala antikroppar med dubbel förbestämd specificitet, ändra produktionen av pentameriskt cytotoxiskt IgM till produktionen av pentameriska icke-cytotoxiska IgM, monomera icke-cytotoxiskt IgM eller IgM med reducerad affinitet och även växel (under bibehållande av antigen) IgM-sekretion till IgD-sekretion och IgGl-sekretion till IgG2a, IgG2b eller IgA-sekretion.

Musgenomet tillhandahåller syntes av över 1 * 107 olika antikroppsvarianter som specifikt interagerar med epitoperna (antigena determinanter) av protein-, kolhydrat- eller lipidantigener som finns i celler eller mikroorganismer. Bildningen av tusentals olika antikroppar mot ett antigen, som skiljer sig i specificitet och affinitet, är möjlig; till exempel inducerar immunisering med homogena humana celler upp till 50 000 olika antikroppar. Med hjälp av en hybrid kan du välja nästan alla varianter av monoklonala antikroppar som kan induceras till detta antigen i kroppen av ett försöksdjur.

Mångfalden av monoklonala antikroppar erhållna mot samma protein (antigen) kräver bestämning av deras finare specificitet. Karaktäriseringen och urvalet av immunglobuliner med de erforderliga egenskaperna bland de många typerna av monoklonala antikroppar som interagerar med det studerade antigenet förvandlas ofta till mer arbetsintensivt experimentellt arbete än att erhålla monoklonala antikroppar. Dessa studier inkluderar separering av uppsättningen antikroppar i grupper specifika för specifika epitoper följt av selektion i varje grupp av det bästa alternativet för affinitet, stabilitet och andra parametrar. För att bestämma epitopspecificiteten används metoden för konkurrerande enzymimmunoanalys oftast..

Det uppskattas att en primär sekvens på 4 aminosyror (den vanliga storleken på en epitop) kan uppstå upp till 15 gånger i aminosyrasekvensen för en proteinmolekyl. Korsreaktioner med monoklonala antikroppar observeras emellertid med en mycket lägre frekvens än vad som kan förväntas från dessa beräkningar. Detta händer eftersom långt ifrån alla dessa ställen uttrycks på proteinmolekylens yta och känns igen av antikroppar. Dessutom detekterar monoklonala antikroppar aminosyrasekvenser endast i en specifik konformation. Man bör komma ihåg att aminosyrasekvensen i en proteinmolekyl inte distribueras statistiskt, och antikroppsbindningsställen är mycket större än den minsta epitopen som innehåller 4 aminosyror..

Användningen av monoklonala antikroppar har öppnat tidigare otillgängliga möjligheter för att studera mekanismerna för den funktionella aktiviteten hos immunoglobuliner. För första gången med monoklonala antikroppar var det möjligt att identifiera antigena skillnader i proteiner som tidigare var serologiskt omöjliga att skilja. Ny subtyp och stamskillnader mellan virus och bakterier fastställdes och nya cellulära antigener upptäcktes. Med användning av monoklonala antikroppar hittades antigena bindningar mellan strukturer, vars förekomst inte kunde bevisas på ett tillförlitligt sätt med användning av polyklonala (konventionella immunsera) sera. Användningen av monoklonala antikroppar gjorde det möjligt att identifiera konservativa antigena determinanter av virus och bakterier med bred gruppspecificitet, liksom stamspecifika epitoper med stor variation och variation..

Av grundläggande betydelse är detekteringen av antigena determinanter med användning av monoklonala antikroppar, som inducerar produktionen av skyddande och neutraliserande antikroppar mot infektionsmedel, vilket är viktigt för utvecklingen av terapeutiska och profylaktiska läkemedel. Interaktionen av monoklonala antikroppar med motsvarande epitoper kan leda till steriska (rumsliga) hinder för manifestationen av den funktionella aktiviteten hos proteinmolekyler, samt till allosteriska förändringar som transformerar konformationen av den aktiva delen av molekylen och blockerar den biologiska aktiviteten hos proteinet.

Endast med hjälp av monoklonala antikroppar var det möjligt att studera mekanismerna för samverkande verkan av immunoglobuliner, ömsesidig potentiering eller ömsesidig hämning av antikroppar riktade mot olika epitoper av samma protein.

För produktion av enorma mängder monoklonala antikroppar används ofta tumörer av mus. Rena preparat av monoklonala antikroppar kan erhållas på serumfria medier i fermenterbara suspensionskulturer eller i dialyssystem, i mikroinkapslade kulturer och anordningar såsom kapillärkulturer. För att erhålla 1 g monoklonala antikroppar krävs ungefär 0,5 liter ascitisk vätska eller 30 1 odlingsvätska som inkuberas i fermentatorer med specifika hybridomceller. Under produktionsbetingelser produceras mycket stora mängder monoklonala antikroppar. Väsentliga kostnader för framställning av monoklonala antikroppar motiveras av den höga effektiviteten för proteingrening på immobiliserade monoklonala antikroppar, och proteingrensningskoefficienten i ett enstegs affinitetskromatografiprocedur når flera tusen. Monoklonal antikroppsbaserad affinitetskromatografi används för att rena tillväxthormon, insulin, interferoner, interleukiner producerade av bakteriestammar, jäst eller eukaryota celler modifierade genom gentekniska metoder.

Användningen av monoklonala antikroppar som en del av diagnostiska satser utvecklas snabbt. År 1984 rekommenderades cirka 60 diagnostiska testsystem framställda med monoklonala antikroppar för kliniska prövningar i USA. Den viktigaste platsen bland dem är ockuperat av testsystem för tidig diagnos av graviditet, bestämning av blodnivåer av hormoner, vitaminer, läkemedel, laboratorium annan diagnostik av infektionssjukdomar.

Kriterierna för val av monoklonala antikroppar för deras användning som diagnostiska reagens är formulerade. Dessa inkluderar hög affinitet för antigenet, vilket säkerställer bindning vid en låg koncentration av antigen, såväl som effektiv konkurrens med antikropparna från värdorganismen som redan har bundit till antigenerna i testprovet; orientering mot det antigeniska stället, vanligtvis inte igenkänt av antikropparna i värdorganismen och därför inte maskerade av dessa antikroppar; orientering mot upprepade antigena determinanter av ytstrukturerna hos det diagnostiserade antigenet; polyvalens som ger högre IgM-aktivitet jämfört med IgG.

Monoklonala antikroppar kan användas som diagnostiska läkemedel för bestämning av hormoner och läkemedel, toxiska föreningar, markörer av maligna tumörer, för klassificering och räkning av leukocyter, mer exakt och snabb bestämning av blodgruppstillhörighet, för upptäckt av antigener av virus, bakterier, protoso, för diagnos av autoimmuna sjukdomar, detektion av autoantikroppar, reumatoidfaktorer, bestämning av klasser av immunglobuliner i blodserum.

Monoklonala antikroppar gör det möjligt att framgångsrikt differentiera yttestrukturerna i lymfocyter och med stor noggrannhet identifiera lymfocyters huvudsubpulationer och klassificera dem i familjer av humant leukemi och lymfomceller. Nya monoklonala antikroppsreagens underlättar bestämningen av B-lymfocyter och T-lymfocyter, underklasser av T-lymfocyter, vilket gör det till ett av de enkla stegen att beräkna blodformeln. Med hjälp av monoklonala antikroppar kan en eller annan underpopulation av lymfocyter selektivt avlägsnas, vilket stänger av motsvarande funktion hos det cellulära immunsystemet.

Metoder utvecklas för att detektera tumörer och deras metastaser i hela organismen genom att introducera radioaktiva isotoper märkta med monoklonala antikroppar specifika för tumörantigener. Förmågan hos monoklonala antikroppar märkta med radioaktiva isotoper att hitta unika antigena determinanter gör det möjligt att bestämma storleken och lokaliseringen av hjärtinfarkt. Detta tillvägagångssätt kan användas för att diagnostisera andra lesioner, inklusive infektiöst ursprung (inklusive parasit- och bakterieprocesser).

Typiskt innehåller monoklonala antikroppsbaserade diagnostiska beredningar immunoglobuliner märkta med radioaktivt jod, peroxidas eller annat enzym som används i enzymimmunanalysreaktioner, såväl som fluorokromer, såsom fluoresceinisotiocyanat, som används i immunofluorescensmetoden. Den höga specificiteten hos monoklonala antikroppar är av särskilt värde när man skapar förbättrade diagnostiska produkter, ökar känsligheten och specificiteten för radioimmuno-analys, enzymimmunanalys, immunfluorescensmetoder för serologisk analys, typ av antigener.

Den terapeutiska användningen av monoklonala antikroppar kan vara effektiv om det är nödvändigt att neutralisera toxiner av olika ursprung, såväl som antigena gifter, för att uppnå immunsuppression under organtransplantation, för att inducera komplementberoende cytolys av tumörceller, för att korrigera sammansättningen av T-lymfocyter och immunregulering, för att neutralisera bakterier som är resistenta mot bakterier antibiotika, passiv immunisering mot patogena virus.

Det huvudsakliga hinderet för den terapeutiska användningen av monoklonala antikroppar är möjligheten att utveckla ogynnsamma immunologiska reaktioner associerade med det heterologa ursprunget till monoklonala immunoglobuliner. För att övervinna detta är det nödvändigt att erhålla humana monoklonala antikroppar. Framgångsrika studier i denna riktning möjliggör användning av monoklonala antikroppar som vektorer för målinriktad leverans av kovalent bundna läkemedel.

Terapeutiska preparat som är specifika för strikt definierade celler och vävnader och med riktad cytotoxicitet utvecklas. Detta uppnås genom konjugering av mycket toxiska proteiner, t.ex. difteritoxin, med monoklonala antikroppar som känner igen målceller. Riktat av monoklonala antikroppar kan kemoterapeutiska medel selektivt förstöra tumörceller i kroppen som bär ett specifikt antigen. Monoklonala antikroppar kan också fungera som en vektor när de införlivas i liposomernas ytstrukturer, vilket säkerställer leverans av betydande mängder läkemedel som finns i liposomer till organ eller målceller.

Den konsekventa användningen av monoklonala antikroppar kommer inte bara att öka informationsinnehållet i vanliga serologiska reaktioner, utan förbereder också uppkomsten av grundläggande nya metoder för att studera interaktionen mellan antigener och antikroppar.